摘要

背景

吞咽固体药物困难是一个常见的问题，尤其是老年人，因为吞咽功能下降，也被称为吞咽困难。针对这种功能障碍的患者，一种简单的悬浮法已经被开发出来，并在日本临床广泛应用。这种方法是用温水将固体药物分解并悬浮。然而，关于多种配方的简单共混悬液的药物稳定性的信息很少，特别是包括酸性或碱性配方。在本研究中，研究了典型降胆固醇药物与碱性氧化镁(MgO)在简单共悬液中的化学稳定性。碱性氧化镁在日本常被用作泻药或抗酸药。

方法

取降胆固醇药物(1片)，加或不加MgO于温水(55℃)中浸泡，室温静置10 min或5 h。制备的悬浮液经高效液相色谱分析。利用核磁共振谱和质谱对降解产物进行了结构分析。

结果

在与MgO共悬的情况下，阿托伐他汀和普伐他汀没有明显的降解，而瑞舒伐他汀在共悬5 h后的回收率明显下降。另一方面，与MgO共悬的辛伐他汀和依泽替米贝分别被部分降解为辛伐他汀酸和吡喃化合物。

结论

阿托伐他汀、普伐他汀和瑞舒伐他汀均可与MgO简单共混，但瑞舒伐他汀片不宜长时间浸泡。此外，不建议将辛伐他汀或依折替贝与MgO一起停用，因为它们会部分降解。

背景

吞咽功能下降是老年人普遍存在的问题，这使得一些患者难以摄入固体口服药物和食物[1,2]。这种吞咽功能障碍，即所谓的吞咽困难，也可发生在患有各种急慢性疾病的患者中，如中风、抑郁症、痴呆和口咽结构或功能异常。当固体口服药物不适用于吞咽功能障碍患者时，需要其他合适的配方或替代给药途径。然而，在大多数情况下，这些药物是不可用的。因此，通常做法是制备片剂和胶囊的水悬浮液，然后进行管给药[3,4]。

该悬浮液通常通过粉碎方法制备，其中片剂粉碎并打开胶囊。然而，也有报道称该方法存在诸如药物损失或临床工作人员接触药物等问题[5,6,7]。因此，为了解决这些问题，我们开发了一种简单悬浮法(SSM)[8]。在SSM中，片剂和胶囊在温水(55℃)中浸泡，容器在室温下放置10分钟，使配方崩解，混合后容易悬浮。悬浮液的形成在温水中很容易，这减少了堵塞进料管的风险。SSM在易于悬浮和通过饲管方面的可行性已被广泛测试，并被发现适用于大多数固体口服药物[8,9,10,11]。该方法简便易行，在日本临床得到广泛应用。然而，对SSM中药物化学稳定性的担忧并未消除[8]。特别是，对多种药物的伴随单混悬液(以下简称“共混悬液”)的化学不相容性知之甚少。例如，某些药物在与酸性或碱性药物共同作用时可能会降解。这一点很重要，因为老年患者通常同时摄入多种药物。

氧化镁(MgO)在东亚被广泛用作泻药和抗酸剂[12]。随着老龄化社会的发展，慢性便秘的老年患者越来越多，该药的使用也越来越频繁[13]。因此，MgO经常与其他与生活方式疾病相关的药物以及常见疾病一起使用。MgO微溶于水，显示出碱性，而镁离子已知会与各种药物形成络合物等相互作用[14]。因此，有必要在SSM条件下对MgO混悬药物的化学稳定性进行评价。Aoki等人[15]报道了氧化镁与硫酸氯吡格雷共悬液中没有发生降解，因为硫酸氯吡格雷含有酯部分。相反，Suryani等[16]报道，酯类前药阿西美辛和头孢多肟proxetil与MgO进行SSM时，酯键被水解。这些化学变化被认为是严重的，因为可能发生胃肠道损伤或药物疗效的某些降低。

血脂异常是心血管疾病的主要危险因素之一，他汀类药物和依折替米布等降胆固醇药物对血脂异常的治疗最为有效[17,18]。这种病在老年人中特别普遍。由于血脂异常患者较多，药物的使用也更加频繁，增加了与MgO同时处方的概率。大多数lcd具有部分结构，易受化学变化的影响。它们在碱性条件下的化学稳定性已经被研究过[19,20,21,22,23,24,25,26,27,28]。然而，在MgO的SSM条件下，情况就不同了，因为药物在这种条件下并不总是完全可溶的，而且配方中含有的各种添加剂可能会影响化学稳定性。因此，本文研究了在SSM条件下与氧化镁共悬浮的典型CLDs的化学稳定性。

方法

试剂

使用的CLDs处方如下:阿托伐他汀片5mg(日本大阪，Sawai)、普伐他汀钠片5mg(日本大阪，Sawai)、瑞舒伐他汀片2.5 mg(日本东京，DSEP)、辛伐他汀片5mg(日本爱知，Teva Takeda Yakuhin)、依泽替米贝片10mg(日本东京，DSEP)。以Magmitt片330 mg (Nihon Shinyaku, Kyoto, Japan)作为含氧化镁制剂。阿托伐他汀片、普伐他汀片、瑞舒伐他汀片、辛伐他汀片、依折替米贝片、MgO片以下分别简称as、PS、RS、SS、EZ、MG。阿托伐他汀水合钙(99.8%)、辛伐他汀(100%)和依泽替米贝(96.3%)购自东京化学工业公司(东京，日本)。普伐他汀钠(99.9%)、瑞舒伐他汀钙(99.7%)、蒸馏水、乙腈、甲醇、三氟乙酸和磷酸二氢钠购自Fujifilm Wako Chemicals(大阪，日本)。蒸馏水、乙腈、甲醇均为高效液相色谱级。磷酸(0.5 M)和氯仿的水溶液购自关东化学(日本东京)。弱酸性阳离子交换树脂AMBERLITE®(IRC76)购自ORGANO (Tokyo, Japan)。膜过滤器DISMIC®-03 JP (0.50 μm)购自Toyo Roshi Kaisha (Tokyo, Japan)。含0.05%四甲基硅烷的氘化氯仿(CDCl3)购自Eurisotop(马萨诸塞州，美国)。含0.03%四甲基硅烷的氘化二甲基亚砜(DMSO-d6)购自Acros Organics (Massachusetts, USA)。

简单悬浮液的制备

将1片CLD片加MG或不加MG(1片)置于含20 mL温蒸馏水(55°C)的50 mL塑料离心管中。将离心管置于室温(约25°C)下10分钟或5小时。然后将混合物旋转1分钟以制备悬浮液。随后立即按照方法1或方法2进行处理(见下文)。在单独的实验中，将浸泡10分钟后制备的简单悬浮液离心，并使用InLab®Routine Pro (Mettler Toledo, Ohio, USA)直接进行HPLC分析和pH测量。在任何实验中，每个CLD片进行三次悬浮液制备。

简单悬浮液的处理

对简单悬浮液进行如下处理，并对所得溶液进行HPLC分析。

方法一:将简单悬浮液完全转移到100 ml的容瓶中，用甲醇(AS, PS, RS, EZ)或乙腈(SS)洗涤管，并将洗涤溶剂放入同一容瓶中。在烧瓶中加入相应有机溶剂的混合物共100 mL，然后超声1分钟，除非另有说明。

方法二:对于SS和EZ，将简单悬浮液离心，将18 mL的水溶液上清液通过阳离子交换树脂柱中和。离心后的残渣中加入18毫升乙腈(用于SS)或甲醇(用于EZ)，搅拌1分钟后再次离心。上清液也通过相同的阳离子交换柱。对离心后的残留物再次进行同样的处理。用各自的有机溶剂收集柱上的流出物，共250 mL。

高效液相色谱分析

高效液相色谱分析采用岛津高效液相色谱系统(京都，日本)进行，如我们之前的论文[29]所述。修改文献[30]中的条件进行反相HPLC分析。Atlantis T3色谱柱(4.6 × 250 mm, 5 μm;Waters, Milford, USA)，采用4.6 × 20 mm, 5 μm的保护柱。表1总结了所用的移动相位和检测波长。HPLC系统在25℃条件下，流速为1.0 mL/min，等压操作。样品经膜过滤器过滤后适当稀释后进样。样品进样量为10 μL。在悬浮液制备后30分钟内获得色谱图。

HPLC分析验证方法

在甲醇中配制阿托伐他汀水合钙、普伐他汀钠、瑞舒伐他汀钙、辛伐他汀、依折替米贝标准原液(约100 μg/mL)。验证用的溶液由原液制备。对5种浓度的样品进行三次分析，其浓度范围分别为稀释后样品中预期药物浓度的1 / 4、1 / 8至2倍。阿托伐他汀、普伐他汀、瑞舒伐他汀、辛伐他汀和依折替米贝的预期药物浓度分别为2.0、2.0、1.0、2.0和4.0 μg/mL。在校准曲线范围内以中、高、低三种浓度制备质控样品。这三种浓度分别是预期药物浓度的一半，三倍浓度，以及减少40%至70%的浓度。通过3天的质控样品重复分析(N = 5)，确定HPLC方法的精密度和重复性。对各种稀释后的样品进行5次分析，分别以信噪比为3和10的浓度确定检出限和定量限。

降解产物的结构解析

用氯仿从SS和MG共悬液的水溶液上清液中提取SS的降解产物，并用核磁共振(NMR)分析其结构。1H和1H解耦的13C NMR波谱和二维NMR波谱用AVANCE 500波谱仪(11.75 T, Bruker Japan, Kanagawa, Japan)在300 K下使用5 mm样品管测量。将SS和MG共悬液的水溶液上清液也注入高效液相色谱仪中，以收集含有降解产物的馏分。除流动相为0.1%三氟乙酸与乙腈(15/85)的混合物外，HPLC条件同上。用微型TOF-Q光谱仪(Bruker Daltonics，神奈川，日本)直接分析，获得高分辨率电喷雾电离质谱(ESI-MS)。

将EZ与MG共混得到的甲醇水溶液注入高效液相色谱仪，分离EZ的降解产物。除流动相为0.1%三氟乙酸与乙腈(40/60)的混合物外，HPLC条件同上。利用上述光谱仪对分离得到的降解产物进行了核磁共振谱和质谱分析。

统计分析

所有数据均以至少三次实验的平均值±标准差表示。所有统计分析均采用单因素方差分析，然后采用Tukey检验来确定显著性。p < 0.05为差异有统计学意义。

目录

摘要 背景 方法 结果 讨论 结论 数据和材料的可用性 缩写 参考文献 致谢 作者信息 道德声明 补充信息 搜索 导航 #####

结果

悬浮液的制备

本研究检查的CLDs如图1所示。这些药物具有部分结构，如对碱性条件不稳定的酯键，或配位基团，如羧基。将SSM应用于其片剂中，在加MG或不加MG的情况下进行崩解，并成功制备其混悬液。除AS外，不含MG的悬浮液的水溶液上清液的pH值接近中性，而含MG的共悬浮液的水上清液的pH值相当碱性(表2)。

CLDs的化学结构。符号:A阿托伐他汀;B普伐他汀;C伐;维辛伐他汀;E ezetimibe

稳定性研究

简单混悬液采用方法1处理，提取液采用高效液相色谱法进行分析。对于AS、PS和RS，在任意波长下，只观察到有MG或不含MG的药物成分的峰，如图2所示。对于SS，当与MG共悬浮时，在tr6.4 min出现了一个降解峰，而没有MG时，降解峰可以忽略不计，如图3A-C所示。降解产物在反相柱中的停留时间较短，表明辛伐他汀通过酯键或内酯部分水解转化为更亲水的产物。对于EZ，当与MG共悬浮时，在tR 10.6 min出现了一个微小的降解峰，而没有MG时则没有出现降解峰，如图3E-G所示。保留时间较长的EZ降解产物被认为比依折麦布更疏水。为了消除进一步恶化的可能性在我的样品处理方法,党卫军的co-suspension毫克或EZ毫克分析后立即中和阳离子交换柱(方法2)。因此,退化的山峰也观察到类似的程度,如图所示图3 d和h。此外,这些退化的山峰也观察到当水的上层清液co-suspensions MG直接注入高效液相色谱系统,如图3B和f的插图所示，这些降解产物的吸收光谱与对应的母体药物的吸收光谱几乎相同，表明发色团结构保持不变。

在SSM条件下，AS(左)、PS(中)和RS(右)在加MG和不加MG条件下的HPLC色谱图。制备以下配方的混悬液，崩解10 min后立即用方法1处理，并进行HPLC分析。见表1。一个是;B + mg;C p;D ps + mg;E RS;frs + mg。符号:1、阿托伐他汀;2、普伐他汀;3、普伐

SSM条件下SS(左)和EZ(右)的HPLC色谱图。采用方法一(A、B、C、E、F、G)或方法二(D、H)制备以下配方的混悬液，并用高效液相色谱法分析所得溶液。除非另有说明，否则在分解10分钟后立即进行分析。图B和F中的插图显示了与MG共悬液的水上清的色谱图。移动相和检测波长;见表1。一个学生;B、D SS + MG;C SS + MG (5 h后);E EZ;F和H EZ + MG;G EZ + MG (5 h后)。符号:1、辛伐他汀;2、ezetimibe;*、降解产物

根据高效液相色谱峰面积测定提取物中药物的含量，并计算测定值与片剂标记量的百分比(表3)。在不含MG的混悬液中，10 min后各药物的百分比为98 ~ 105%，5 h后各药物的百分比未见明显下降。与没有MG的患者相比，阿托伐他汀和普伐他汀的百分比没有显著下降，而瑞舒伐他汀在5h后的百分比有相当大的下降。

降解产物的结构解析

SS - MG共混悬液的氯仿提取物由于降解产物的存在而存在一个主要的HPLC峰。辛伐他汀及其提取物的1H NMR谱如图4所示。在图4B中，我们观察到降解产物产生的主要信号和辛伐他汀不变产生的次要信号。由于辛伐他汀的内酯部分，信号(H5)在降解产物中发生了很大的移位。降解产物的精确质谱在M /z 459.2737处出现离子峰[M + Na]+，表明降解产物的分子式为C25H40O6。分子量为436，比辛伐他汀(C25H38O5)大18(水分子)。这些数据表明辛伐他汀的内酯部分水解，导致辛伐他汀酸的形成(图5)，如先前文献[25]所报道的那样。图4B中几乎所有的主要1H信号都被分配给辛伐他汀酸的单个质子。因此，SS降解产物被鉴定为辛伐他汀酸，这也得到了13C NMR和二维NMR波谱数据的支持(补充图1、2、3和4)。

辛伐他汀(A)和SS与MG共混悬液氯仿提取物(B)的1H NMR谱图。氯仿提取物中主要含有降解产物辛伐他汀酸，少量辛伐他汀不变(星号)。由于配方的添加，认为谱(B)也包含一些信号。光谱上的数字字符(A)和(B)分别显示了图1(辛伐他汀)和图5(辛伐他汀酸)中所示的化学结构的信号分配

降解产物的化学结构。I:辛伐他汀酸，II: (2R,3R,6S)- n,6-二(4-氟苯基)-2-(4-羟基苯基)-3,4,5,6-四氢- 2h -吡喃-3-羧酰胺

将EZ降解产物的1H NMR谱(补充图5)与ezetimibe的1H NMR谱(补充图5)进行比较，发现ezetimibe的5位和6位(见图1)引起的1H信号在化学位移和信号形状上发生了很大的变化。降解产物的精确质谱在m/z 4322.1402 [m + Na]+处出现离子峰，表明其分子式为C24H21F2NO3。这些数据表明，该产物是先前文献[27]报道的吡喃化合物ezetimibe的结构异构体(图5，化合物II)。产物的1H NMR谱与文献中吡喃化合物的谱数据基本一致。该结构得到了13C和二维核磁共振光谱数据的支持(补充图6、7、8和9)。

HPLC法的验证

HPLC法对单个药物的线性度、精密度、LOD和LOQ进行验证，如补充表1和2所示。在检测浓度范围内，校准曲线线性良好，决定系数(r2)均大于0.999。日内、日间相对标准偏差分别小于1.9%和2.4%。定量限和定量限分别为16 ~ 65 ng/mL和47 ~ 262 ng/mL。所有验证参数均在验收范围内。

讨论

本研究检测的CLDs在水碱性条件下的化学稳定性已有很多报道(表4)。大多数情况下使用的是较强的条件，药物或多或少被分解。因此，需要研究单个药物在MG - SSM条件下的化学稳定性。在临床环境中，由于商业原因，制备好的简单混悬液有时会在给药前放置很长时间[31]。因此，本研究分别制备浸泡5h和10min后的简单混悬液进行分析，为安全起见，假设最长停留时间为5h。

实验结果表明，无论是否添加MG，阿托伐他汀和普伐他汀在SSM条件下都是化学稳定的。相比之下，瑞舒伐他汀与MG共混悬液的回收率在5小时后显著下降。这种下降似乎是由于瑞舒伐他汀吸附了大量的MgO和/或与Mg2+形成了未溶解的配合物[14]。当共混悬液饭后摄入时，瑞舒伐他汀的这些假定的相互作用可能至少暂时在胃中保持不变，因为胃内容物的酸度因进食而显著降低(pH ~ 5) [32]， MgO中和胃酸。有报道称，瑞舒伐他汀与氢氧化镁同时服用可显著降低血药浓度[33]。可以推测与上述类似的现象发生在胃中，导致瑞舒伐他汀进入胃肠道的吸收延迟和减少。如表3所示，无论浸泡时间和中和作用如何，与MG共悬均可显著降低辛伐他汀占标记量的百分比。虽然与MG共悬液也降低了依折替米布的百分比，但由于降解较低，这种降低并不一定具有统计学意义。

当SS和MG的共混悬液最初用方法1处理时，用甲醇作为洗涤溶剂。当时的HPLC图谱显示两个降解峰，其中一个鉴定为辛伐他汀酸，保留时间较短，另一个鉴定为辛伐他汀酸，保留时间较长(补充图10)。后一个峰估计是由辛伐他汀酸甲酯引起的，这是对该峰对应的HPLC部分进行核磁共振光谱和质谱(精确质量)分析的结果(数据未显示)。Yang等[25]也报道了辛伐他汀酸在碱性甲醇水溶液中形成辛伐他汀酸甲酯。这些发现表明，由于SSM本身的降解可能被甲醇处理高估了。因此，用乙腈处理SS混悬液，辛伐他汀酸是MG共混悬液中唯一的降解产物。

一般来说，已知他汀类药物在活性羟基酸形式和内酯形式之间表现出ph依赖的相互转化[24,25,34,35]。据报道，他汀类药物在强酸条件下以混合物的形式存在，而在碱性条件下，他汀类药物仅以羟基酸形式存在。辛伐他汀作为内酯形式，即前药，在体内水解为活性羟基酸形式后发挥药理作用。本研究发现，辛伐他汀在MG的SSM条件下部分转化为亲脂性较低的羟基酸辛伐他汀酸。这种在摄入前的转化可能会降低辛伐他汀的疗效，因为辛伐他汀酸与辛伐他汀相比在胃肠道中的吸收较差。

也有报道称依zetimibe在碱性条件下发生β-内酰胺的裂解和环转化为吡喃化合物[28]。这些反应取决于溶液的pH值，其中吡喃化合物主要在pH值7到12.5之间形成。虽然在文献中已证明依折替米贝在强条件下分解为吡喃化合物，但在与MG的SSM条件下，发现同样的分解也轻微发生。

用于SSM的水的温度(55°C)是一个粗略的指示。之所以选择温度，是因为在室温下放置10分钟后，温度保持在37℃左右[8]。一般来说，在临床环境中不测量所用水的温度，因此共混悬液可能在更高的温度下制备。在这种情况下，降解可能会加速。本研究中观察到的降解似乎也发生在与其他碱性药物(如氢氧化镁)共混悬液中[14]。

本研究针对的是CLDs的特定仿制药，值得关注的是，包括原研药和仿制药在内的其他制剂是否也得到了类似的结果。虽然使用了各种酸性和碱性添加剂，但在大多数情况下，其用量被认为小于共悬浮氧化镁(330毫克)，因为除了一些口腔崩解片外，通常使用相对较小的片剂(少于200毫克)。因此，碱度和假定的相互作用被认为在很大程度上取决于MgO。因此，可以推测，使用大多数其他配方的氧化镁量也将获得与目前的结果相当的结果。

结论

在SSM条件下，研究了典型CLDs在含有一定量MgO的共悬浮液中的化学稳定性。我们发现，阿托伐他汀和普伐他汀可以经受共悬而没有明显的化学变化。然而，瑞舒伐他汀的共混悬液最好在崩解10min后迅速制备并使用。辛伐他汀和依折替米贝由于其部分降解，应避免与MgO共混悬液。虽然这项研究是针对特定的仿制药进行的，但这些数据应该被认为是与MgO的其他配方共混悬液的信息。

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